?本期AVT與您共同解讀國(guó)jia藥監(jiān)局藥品審評(píng)中心發(fā)布的《化學(xué)藥品注射劑滅菌和滅菌工藝研究及驗(yàn)證指導(dǎo)原則》（草案），首先我們給大家分享來自GMP辦公室對(duì)該指導(dǎo)原則發(fā)表的解讀觀點(diǎn)，一起來看下吧！

?分享GMP辦公室發(fā)布《【重磅】剛剛！國(guó)jia藥監(jiān)局發(fā)布《注射劑滅菌和滅菌工藝研究及驗(yàn)證指導(dǎo)原則》??！》，文中觀點(diǎn)總結(jié)如下：

?明確了滅菌工藝選擇的決策樹：注射劑的濕熱滅菌工藝應(yīng)shou選過度殺滅法，即F0（標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間）值大于12的滅菌工藝；對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物，可以選擇殘存概率法，即F0值大于8的滅菌工藝。如果F0值不能達(dá)到8，提示選擇濕熱滅菌工藝不合適，需要考慮無(wú)菌生產(chǎn)工藝。

?應(yīng)shou選終端滅菌工藝，任何商業(yè)上的考慮均不能作為不采用具有zui高無(wú)菌保證水平的終端滅菌工藝的理由。

?關(guān)于熱降解雜質(zhì)，對(duì)于一般降解雜質(zhì)，不應(yīng)僅僅因?yàn)槠浜砍^ ICHQ3A、Q3B指導(dǎo)原則規(guī)定的限度，就排除濕熱滅菌工藝而不進(jìn)行論證，如果一般降解雜質(zhì)確證為代謝產(chǎn)物或其含量水平已經(jīng)過確認(rèn)在可接受的范圍內(nèi)，仍推薦采用濕熱滅菌工藝。

?也可以采用其他方法降低產(chǎn)品熱不穩(wěn)定性：例如采用充氮工藝或在處方中加入適宜的抗氧化劑來減少氧化雜質(zhì)的產(chǎn)生；選擇利于藥物活性成分穩(wěn)定的pH值范圍、溶劑系統(tǒng)、輔料等；通過滅菌時(shí)間和滅菌溫度的調(diào)整來選擇藥物可以耐受的濕熱滅菌工藝條件等。

?注射劑包裝系統(tǒng)的選擇和設(shè)計(jì)可能影響濕熱滅菌工藝條件選擇和zui終無(wú)菌保證水平。研究中需要結(jié)合產(chǎn)品特性、包裝系統(tǒng)的相容性、以及滅菌器的滅菌原理等因素，對(duì)包裝系統(tǒng)的種類、性狀、尺寸進(jìn)行篩選，保證所選的滅菌工藝條件不會(huì)對(duì)包裝系統(tǒng)的密封性和相容性產(chǎn)生不利的影響，如包裝系統(tǒng)的變形、破裂，或者浸出物超過可接受的水平等。應(yīng)該注意的是，使用熱不穩(wěn)定的包裝系統(tǒng)不能作為選擇無(wú)菌工藝的理由。

?關(guān)于產(chǎn)品穩(wěn)定性研究，提出穩(wěn)定性研究樣品zui好選取處于最苛刻滅菌條件下的產(chǎn)品，如可選取在熱穿透試驗(yàn)中F0zui大或滅菌參數(shù)值（zui高允許滅菌溫度和/或最長(zhǎng)滅菌時(shí)間）zui大位置處的滅菌產(chǎn)品進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確保所有滅菌產(chǎn)品的質(zhì)量在有效期內(nèi)仍能符合要求。

?仿制注射劑滅菌工藝的選擇：仿制注射劑選擇的滅菌/除菌工藝，應(yīng)能保證其無(wú)菌保證水平不低于參比制劑。如果參比制劑采用了無(wú)菌生產(chǎn)工藝，若仿制注射劑對(duì)其處方組成合理性、滅菌工藝產(chǎn)生的降解雜質(zhì)的安全性風(fēng)險(xiǎn)等因素進(jìn)行了全面的論證之后，也可以采用濕熱滅菌工藝。同時(shí)，參比制劑也需要考慮完善工藝。

?關(guān)于濕熱滅菌裝載熱分布試驗(yàn)：溫度探頭的個(gè)數(shù)和安裝位置應(yīng)綜合滅菌器的幾何形狀、空腔尺寸、產(chǎn)品排列方式以及空載熱分布確認(rèn)的結(jié)果等要素確定，且至少應(yīng)涵蓋空載熱分布測(cè)試獲得的高溫點(diǎn)、低溫點(diǎn)，滅菌器自身溫度測(cè)試探頭部位等特殊位置。溫度探頭在該階段測(cè)試中應(yīng)固定，且安放在待滅菌容器的周圍，注意不能接觸待滅菌容器或非常接近滅菌器內(nèi)壁。

?裝載熱分布試驗(yàn)需要考慮zui大、最小和生產(chǎn)過程中典型裝載量情況，試驗(yàn)時(shí)應(yīng)盡可能使用待滅菌產(chǎn)品。如果采用類似物，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品的熱力學(xué)性質(zhì)等進(jìn)行適當(dāng)?shù)娘L(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

?熱穿透試驗(yàn)的溫度探頭的個(gè)數(shù)和采樣位置可參考裝載熱分布設(shè)置，采樣位置的確定應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的原則，包括熱分布試驗(yàn)確定的高溫點(diǎn)和低溫點(diǎn)、其他可能的高溫點(diǎn)、滅菌器溫度探頭附近、產(chǎn)品溫度記錄探頭處等。除要求采用足夠數(shù)量的溫度探頭外，還應(yīng)將熱穿透溫度探頭置于藥液中最難或最遲達(dá)到滅菌溫度的點(diǎn)，即整個(gè)包裝中最難滅菌的位置。對(duì)于小容量注射液，如果有數(shù)據(jù)支持或有證據(jù)表明將探頭放在產(chǎn)品包裝之外也能夠反映出產(chǎn)品的滅菌程度，風(fēng)險(xiǎn)能夠充分得到控制，也可以考慮將探頭放在容器之外。

?熱分布和熱穿透試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理需要關(guān)注的主要參數(shù)：

?·保溫階段每個(gè)探頭所測(cè)得溫度的變化范圍

?·保溫階段不同探頭之間測(cè)得的溫度差值

?·保溫階段探頭測(cè)得的溫度與設(shè)定溫度之間的差值

?·升溫階段探頭測(cè)得達(dá)到設(shè)定溫度的最短及最長(zhǎng)時(shí)間

?·F0的下限及上限

?·滅菌結(jié)束時(shí)的zui低F0值

?·保溫階段的zui低和zui高壓力

?·飽和蒸汽溫度和壓力之間的關(guān)系

?·保溫階段腔室的zui低和zui高溫度

?·熱穿透溫度探頭之間的zui大溫差或F0的變化范圍

?·最長(zhǎng)平衡時(shí)間

?·最少正常運(yùn)行的探頭數(shù)

?熱分布試驗(yàn)的保溫時(shí)間內(nèi)溫度波動(dòng)應(yīng)在±1.0℃之內(nèi)。

?升、降溫過程的溫度波動(dòng)可通過總體F0值來反映，如果溫度或F0值差別過大，提示滅菌器的性能不符合要求、裝載方式選擇不當(dāng)?shù)?，需要尋找原因并進(jìn)行改進(jìn)，重新進(jìn)行驗(yàn)證。

?對(duì)于熱敏感的藥物，還應(yīng)該控制滅菌器的升溫和降溫時(shí)間，以保證輸入的熱能控制在合理的范圍內(nèi)，不會(huì)對(duì)產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性造成影響。

?減少驗(yàn)證工作的方法：濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，如存在不同滅菌器（一般指相同工作和設(shè)計(jì)原理的滅菌器）、處方組成、容器規(guī)格、裝量、裝載方式等情況。在不犧牲無(wú)菌保證水平的前提下，為減少驗(yàn)證試驗(yàn)數(shù)量，降低驗(yàn)證成本，可綜合各方面因素考慮，在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，通過充分的合理性論證，選用具有代表性的滅菌器、待滅菌產(chǎn)品和裝載方式等進(jìn)行滅菌工藝驗(yàn)證，可不必對(duì)所有情況進(jìn)行驗(yàn)證。

?關(guān)于濾器重復(fù)使用時(shí)的驗(yàn)證考慮：過濾器的重復(fù)使用對(duì)于制藥過程來說通常是不被推薦的，如在實(shí)際工作中存在重復(fù)使用的情況，應(yīng)進(jìn)行充分的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，包括細(xì)菌的穿透、過濾器完整性缺陷、可提取物的增加、清洗方法對(duì)產(chǎn)品內(nèi)各組分清洗的適用性、產(chǎn)品存在的殘留（或組分經(jīng)滅菌后的衍生物）對(duì)下一批次產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)的影響、過濾器過早堵塞、過濾器組件老化引起的性能改變等，并提供充分的驗(yàn)證和數(shù)據(jù)支持。

?關(guān)于采用減菌過濾工藝時(shí)應(yīng)進(jìn)行的驗(yàn)證：減菌過濾通常設(shè)計(jì)在終端滅菌工藝生產(chǎn)的無(wú)菌制劑的灌裝前端，或非最終滅菌工藝生產(chǎn)的無(wú)菌制劑的除菌過濾工序前端。通常采用0.45μm或0.22μm（及以下）孔徑的過濾器。針對(duì)減菌過濾應(yīng)進(jìn)行的驗(yàn)證包括化學(xué)兼容性、可提取物/浸出物及吸附試驗(yàn)等。

?給出D值的測(cè)定方法

?給出生物指示劑用量的確定方法，包括①陰性分?jǐn)?shù)法②殘存曲線法

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化學(xué)藥品注射劑滅菌/無(wú)菌工藝研究及驗(yàn)證指導(dǎo)原則

?目錄

?一、概述

?二、注射劑濕熱滅菌工藝

?（一）濕熱滅菌工藝的研究

?1.濕熱滅菌工藝的確定依據(jù)

?2.微生物污染的監(jiān)控

?（二）濕熱滅菌工藝的驗(yàn)證

?1.物理確認(rèn)

?2.生物學(xué)確認(rèn)

?3.基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的驗(yàn)證方案設(shè)計(jì)

?三、注射劑無(wú)菌生產(chǎn)工藝

?（一）無(wú)菌生產(chǎn)工藝的研究

?1.除菌過濾工藝的研究

?2.無(wú)菌分裝工藝的研究

?（二）無(wú)菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證

?1.除菌過濾工藝驗(yàn)證

?2.無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)

?四、附件

?五、參考文獻(xiàn)

?一、概述

?無(wú)菌藥品是指法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中列有無(wú)菌檢查項(xiàng)目的制劑和原料藥，一般包括注射劑、無(wú)菌原料藥及滴眼劑等。從嚴(yán)格意義上講，無(wú)菌藥品應(yīng)不含任何活的微生物，但由于目前檢驗(yàn)手段的局限性，jue對(duì)無(wú)菌的概念不能適用于對(duì)整批產(chǎn)品的無(wú)菌性評(píng)價(jià)，因此目前所使用的“無(wú)菌”概念，是概率意義上的“無(wú)菌”。特定批次藥品的無(wú)菌特性只能通過該批藥品中活微生物存在的概率低至某個(gè)可接受的水平，即無(wú)菌保證水平（Sterility Assurance Level, SAL）來表征，而這種概率意義上的無(wú)菌需通過合理設(shè)計(jì)和全面驗(yàn)證的滅菌/除菌工藝過程、良好的無(wú)菌保證體系以及在生產(chǎn)過程中執(zhí)行嚴(yán)格的藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）予以保證。

?本指導(dǎo)原則主要參考國(guó)內(nèi)外相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則和標(biāo)準(zhǔn)起草制訂，重點(diǎn)對(duì)注射劑常用的滅菌/無(wú)菌工藝，即濕熱滅菌為主的終端滅菌工藝（terminal sterilizing process）和無(wú)菌生產(chǎn)工藝（aseptic processing）的研究和驗(yàn)證進(jìn)行闡述，旨在促進(jìn)現(xiàn)階段化學(xué)藥品注射劑的研究和評(píng)價(jià)工作的開展。本指導(dǎo)原則主要適用于無(wú)菌注射劑申請(qǐng)上市以及上市后變更等注冊(cè)申報(bào)過程中對(duì)滅菌/無(wú)菌工藝進(jìn)行的研究和驗(yàn)證工作，相關(guān)儀器設(shè)備等的驗(yàn)證及常規(guī)再驗(yàn)證不包括在本指導(dǎo)原則的范圍內(nèi)。

?本指導(dǎo)原則的起草是基于對(duì)該問題的當(dāng)前認(rèn)知，隨著相關(guān)法規(guī)的不斷完善以及藥物研究技術(shù)要求的提高，本技術(shù)指南將不斷修訂并完善。

?二、注射劑濕熱滅菌工藝

?（一）濕熱滅菌工藝的研究

?1.濕熱滅菌工藝的確定依據(jù)

?滅菌工藝的選擇一般按照滅菌工藝選擇的決策樹（詳見附件1）進(jìn)行，濕熱滅菌工藝是決策樹中首先考慮的滅菌方法。濕熱滅菌法是利用飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性從而殺滅微生物的方法。

?注射劑的濕熱滅菌工藝應(yīng)shou選過度殺滅法，即F0（標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間）值大于12的滅菌工藝；對(duì)熱不穩(wěn)定的藥物，可以選擇殘存概率法，即F0值大于8的滅菌工藝。如果F0值不能達(dá)到8，提示選擇濕熱滅菌工藝不合適，需要考慮無(wú)菌生產(chǎn)工藝。

?以上兩種濕熱滅菌工藝都可以在實(shí)際生產(chǎn)中使用，具體選擇哪種滅菌工藝，在很大程度上取決于產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性。藥物是否能耐受濕熱滅菌工藝，除了與藥物活性成分的化學(xué)性質(zhì)相關(guān)外，還與制劑的處方、工藝、包裝容器等密切相關(guān)，所以在初期的工藝設(shè)計(jì)過程中需要通過對(duì)藥物熱穩(wěn)定性的綜合分析來確定濕熱滅菌工藝的可行性。

?一般而言，需要通過各個(gè)方面的研究，使藥物盡可能地可以采用濕熱滅菌工藝。只有在理論和實(shí)踐均證明即使采用了各種可行的技術(shù)方法之后，藥物活性成分依然無(wú)法耐受濕熱滅菌工藝時(shí)，才能選擇無(wú)菌保證水平較低的無(wú)菌生產(chǎn)工藝。任何商業(yè)上的考慮均不能作為不采用具有zui高無(wú)菌保證水平的終端滅菌工藝的理由。

?1.1藥物活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與穩(wěn)定性

?通過對(duì)藥物活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，可以初步判斷藥物活性成分的穩(wěn)定性，如果其結(jié)構(gòu)中含有一些對(duì)熱不穩(wěn)定的化學(xué)基團(tuán)，則提示該藥物活性成分的熱穩(wěn)定性可能較差。在此基礎(chǔ)之上，還應(yīng)該通過設(shè)計(jì)一系列的強(qiáng)制降解試驗(yàn)對(duì)藥物活性成分的穩(wěn)定性做進(jìn)一步研究確認(rèn)，了解在各種條件下可能發(fā)生的降解反應(yīng)，以便在處方工藝研究中采取針對(duì)性的措施，保障產(chǎn)品能夠采用濕熱滅菌工藝。對(duì)于一般降解雜質(zhì)，不應(yīng)僅僅因?yàn)槠浜砍^ ICHQ3A、Q3B指導(dǎo)原則規(guī)定的限度，就排除濕熱滅菌工藝而不進(jìn)行論證，如果一般降解雜質(zhì)確證為代謝產(chǎn)物或其含量水平已經(jīng)過確認(rèn)在可接受的范圍內(nèi)，仍推薦采用濕熱滅菌工藝。

?1.2處方工藝

?在對(duì)藥物活性成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與穩(wěn)定性進(jìn)行研究的基礎(chǔ)上，可以有針對(duì)性地進(jìn)行處方工藝的優(yōu)化研究。例如采用充氮工藝或在處方中加入適宜的抗氧化劑來減少氧化雜質(zhì)的產(chǎn)生；選擇利于藥物活性成分穩(wěn)定的pH值范圍、溶劑系統(tǒng)、輔料等；通過滅菌時(shí)間和滅菌溫度的調(diào)整來選擇藥物可以耐受的濕熱滅菌工藝條件等。

?1.3 包裝系統(tǒng)

?注射劑包裝系統(tǒng)的選擇和設(shè)計(jì)也是可能影響濕熱滅菌工藝條件選擇和最終無(wú)菌保證水平的重要因素。研究中需要結(jié)合產(chǎn)品特性、包裝系統(tǒng)的相容性、以及滅菌器的滅菌原理等因素，對(duì)包裝系統(tǒng)的種類、性狀、尺寸進(jìn)行篩選，保證所選的滅菌工藝條件不會(huì)對(duì)包裝系統(tǒng)的密封性和相容性產(chǎn)生不利的影響，如包裝系統(tǒng)的變形、破裂，或者浸出物超過可接受的水平等。應(yīng)該注意的是，使用熱不穩(wěn)定的包裝系統(tǒng)不能作為選擇無(wú)菌工藝的理由。

?1.4注射劑的穩(wěn)定性研究

?無(wú)論使用何種設(shè)計(jì)方法，都需要進(jìn)行終端滅菌產(chǎn)品的穩(wěn)定性研究?？疾旖K端滅菌工藝對(duì)產(chǎn)品穩(wěn)定性影響的指標(biāo)可包括有關(guān)物質(zhì)、含量、pH值、顏色以及產(chǎn)品的其它關(guān)鍵質(zhì)量屬性。

?滅菌時(shí)，微生物的殺滅效果和藥物活性成分的降解程度都是溫度和時(shí)間累積作用的結(jié)果。這意味著加熱和冷卻過程的變化也可能影響微生物的殺滅效果和產(chǎn)品的穩(wěn)定性。因此，穩(wěn)定性研究用樣品zui好選取處于最苛刻滅菌條件下的產(chǎn)品，如可選取在熱穿透試驗(yàn)中F0zui大或滅菌參數(shù)值（zui高允許滅菌溫度和/或最長(zhǎng)滅菌時(shí)間）zui大位置處的滅菌產(chǎn)品進(jìn)行穩(wěn)定性考察，以確保所有滅菌產(chǎn)品的質(zhì)量在有效期內(nèi)仍能符合要求。

?1.5 仿制注射劑滅菌工藝的選擇

?仿制注射劑選擇的滅菌/除菌工藝，應(yīng)能保證其無(wú)菌保證水平不低于參比制劑。如果參比制劑采用了無(wú)菌生產(chǎn)工藝，若仿制注射劑對(duì)其處方組成合理性、滅菌工藝產(chǎn)生的降解雜質(zhì)的安全性風(fēng)險(xiǎn)等因素進(jìn)行了全面的論證之后，也可以采用濕熱滅菌工藝。同時(shí)，參比制劑也需要考慮完善工藝。

?2. 微生物污染的監(jiān)控

?過度殺滅法假設(shè)的微生物污染水平和耐熱性都高于實(shí)際值，理論上能完全殺滅微生物，從而能提供很高的無(wú)菌保證值，故沒有必要對(duì)每一批次產(chǎn)品進(jìn)行微生物污染水平的監(jiān)控。從控制熱原的角度，建議按照藥品GMP管理，以適當(dāng)?shù)念l次對(duì)微生物污染水平進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

?與過度殺滅法相比，殘存概率法的熱能較低，為不降低產(chǎn)品的無(wú)菌保證水平，除了需要對(duì)滅菌過程本身進(jìn)行嚴(yán)格的控制以外，還需要合理的工藝設(shè)計(jì)來降低微生物污染，并采用適當(dāng)?shù)姆椒▽?duì)微生物污染水平和耐熱性進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

?2.1 降低滅菌前微生物污染的工藝設(shè)計(jì)

?在生產(chǎn)工藝各環(huán)節(jié)引入微生物的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估基礎(chǔ)上，通常考慮采用藥液過濾、藥液存放時(shí)限控制等方法來降低注射劑滅菌前的微生物污染。雖然藥液過濾在終端滅菌產(chǎn)品的生產(chǎn)中僅僅作為輔助的控制手段，但是在工藝研究過程中，也應(yīng)該對(duì)濾膜的孔徑、材質(zhì)、使用周期等基本性質(zhì)進(jìn)行必要的篩選和驗(yàn)證，并在工藝操作中進(jìn)行相應(yīng)的規(guī)定。藥液在制備、分裝過程中易引起微生物繁殖，尤其一些營(yíng)養(yǎng)型的注射劑，因此應(yīng)通過必要的考察和驗(yàn)證來確定藥液配制至過濾前、以及過濾、灌裝后至滅菌前能夠放置的最長(zhǎng)時(shí)限，并相應(yīng)確定產(chǎn)品的批量和生產(chǎn)周期。

?2.2 滅菌前微生物污染的監(jiān)測(cè)

?滅菌前微生物污染水平監(jiān)測(cè)的取樣應(yīng)覆蓋正常生產(chǎn)的整個(gè)過程，應(yīng)選取生產(chǎn)過程中污染zui大，最有代表性的樣品，且要充分考慮到產(chǎn)品從灌封到滅菌前的放置時(shí)間。一般而言，如果灌裝需要持續(xù)一段時(shí)間，可從每批產(chǎn)品灌裝開始、中間及結(jié)束時(shí)分別取樣。滅菌前微生物污染水平監(jiān)測(cè)通常采用薄膜過濾法，方法應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證，具體操作可參照《中國(guó)藥典》的“微生物限度檢查法”。

?對(duì)于滅菌前微生物污染水平監(jiān)測(cè)中發(fā)現(xiàn)有污染菌的產(chǎn)品，應(yīng)采用合適的方法進(jìn)行污染菌的耐熱性檢查。耐熱性檢查中任何幸存下來或生長(zhǎng)的微生物都可以被假定為耐熱菌，一般采用定時(shí)煮沸法將它與已知的生物指示劑的耐熱性加以比較，必要時(shí)，可進(jìn)一步測(cè)試耐熱污染菌的D值（微生物耐熱參數(shù)，D值的具體檢測(cè)方法詳見附件2），然后根據(jù)滅菌的F0值及污染菌的數(shù)量與耐熱性對(duì)產(chǎn)品的無(wú)菌性做出評(píng)價(jià)。當(dāng)產(chǎn)品微生物污染水平超過限度時(shí)，應(yīng)對(duì)污染菌進(jìn)行鑒別，調(diào)查污染菌的來源并采用相應(yīng)的糾正措施。

?（二）濕熱滅菌工藝的驗(yàn)證

?濕熱滅菌工藝的驗(yàn)證一般分為物理確認(rèn)和生物學(xué)確認(rèn)兩部分，物理確認(rèn)包括熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)等，生物學(xué)確認(rèn)主要是微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)。物理確認(rèn)和微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)一致，兩者不能相互替代。

?1.物理確認(rèn)

?1.1 物理確認(rèn)的前提

?物理確認(rèn)所用的溫度測(cè)試系統(tǒng)應(yīng)在驗(yàn)證和/或試驗(yàn)前、后進(jìn)行校準(zhǔn)，校準(zhǔn)的頻次應(yīng)根據(jù)儀器設(shè)備的性能、驗(yàn)證持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)短來確定。

?物理確認(rèn)所涉及的滅菌設(shè)備，應(yīng)該在滅菌工藝驗(yàn)證前已通過設(shè)備確認(rèn)。如果在實(shí)施滅菌工藝驗(yàn)證前已經(jīng)在包含擬驗(yàn)證工藝條件下完成了空載熱分布試驗(yàn)，且在驗(yàn)證合格期限內(nèi)，原則上可以引用相關(guān)數(shù)據(jù)和結(jié)論。

?1.2裝載熱分布試驗(yàn)

?裝載熱分布試驗(yàn)的目的是在擬采用的裝載方式下，考察產(chǎn)品裝載區(qū)內(nèi)實(shí)際獲得的滅菌條件與設(shè)計(jì)的滅菌周期工藝參數(shù)的符合性。了解裝載區(qū)內(nèi)的溫度分布狀況，包括高溫點(diǎn)（熱點(diǎn)）、低溫點(diǎn)（冷點(diǎn)）的位置，為后續(xù)的評(píng)估和驗(yàn)證提供科學(xué)依據(jù)。裝載熱分布一般在空載熱分布的基礎(chǔ)上進(jìn)行。溫度探頭的個(gè)數(shù)和安裝位置應(yīng)綜合滅菌器的幾何形狀、空腔尺寸、產(chǎn)品排列方式以及空載熱分布確認(rèn)的結(jié)果等要素確定，且至少應(yīng)涵蓋空載熱分布測(cè)試獲得的高溫點(diǎn)、低溫點(diǎn)，滅菌器自身溫度測(cè)試探頭部位等特殊位置。溫度探頭在該階段測(cè)試中應(yīng)固定，且安放在待滅菌容器的周圍，注意不能接觸待滅菌容器或非常接近滅菌器內(nèi)壁。

?裝載熱分布試驗(yàn)需要考慮zui大、最小和生產(chǎn)過程中典型裝載量情況，試驗(yàn)時(shí)應(yīng)盡可能使用待滅菌產(chǎn)品。如果采用類似物，應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品的熱力學(xué)性質(zhì)等進(jìn)行適當(dāng)?shù)娘L(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。待滅菌產(chǎn)品的裝載方式和滅菌工藝等各項(xiàng)參數(shù)的設(shè)定應(yīng)與正常生產(chǎn)時(shí)一致，應(yīng)采用適宜的方式（圖表或照片）描述產(chǎn)品的裝載方式，并評(píng)估探頭放置是否合理。每一裝載方式的熱分布試驗(yàn)需要至少連續(xù)進(jìn)行三次。

?1.3 熱穿透試驗(yàn)

?熱穿透試驗(yàn)用于考察滅菌器和滅菌程序?qū)Υ郎缇a(chǎn)品的適用性，目的是確認(rèn)產(chǎn)品內(nèi)部也能達(dá)到預(yù)定的滅菌溫度、滅菌時(shí)間或F0值。一個(gè)好的滅菌器和滅菌程序，既要使所有待滅菌產(chǎn)品達(dá)到一定的F0值，以保障產(chǎn)品的SAL≤10－6，同時(shí)又不能使部分產(chǎn)品受熱過度而造成產(chǎn)品中活性成分的降解，導(dǎo)致同一滅菌批次的產(chǎn)品出現(xiàn)質(zhì)量不均一。

?熱穿透試驗(yàn)的溫度探頭的個(gè)數(shù)和采樣位置可參考裝載熱分布設(shè)置，采樣位置的確定應(yīng)基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的原則，包括熱分布試驗(yàn)確定的高溫點(diǎn)和低溫點(diǎn)、其他可能的高溫點(diǎn)、滅菌器溫度探頭附近、產(chǎn)品溫度記錄探頭處等。除要求采用足夠數(shù)量的溫度探頭外，還應(yīng)將熱穿透溫度探頭置于藥液中最難或最遲達(dá)到滅菌溫度的點(diǎn)，即整個(gè)包裝中最難滅菌的位置。對(duì)于小容量注射液，如果有數(shù)據(jù)支持或有證據(jù)表明將探頭放在產(chǎn)品包裝之外也能夠反映出產(chǎn)品的滅菌程度，風(fēng)險(xiǎn)能夠充分得到控制，也可以考慮將探頭放在容器之外。

?熱穿透試驗(yàn)的步驟及要求與裝載熱分布試驗(yàn)基本相同，每一裝載方式的熱穿透試驗(yàn)也需要至少進(jìn)行三次。通過熱穿透試驗(yàn)可以確定在設(shè)定的滅菌程序下，滅菌器內(nèi)各個(gè)位置的待滅菌產(chǎn)品是否能夠到達(dá)設(shè)定的溫度、時(shí)間或F0值。再結(jié)合滅菌前微生物污染水平的檢測(cè)，可以確定滅菌器內(nèi)各個(gè)位置的待滅菌產(chǎn)品是否能夠達(dá)到預(yù)期的無(wú)菌保證水平。

?對(duì)于F0值zui大點(diǎn)位置的樣品，由于其受熱情況最為強(qiáng)烈，因此應(yīng)評(píng)估該位置產(chǎn)品的穩(wěn)定性情況，以進(jìn)一步確認(rèn)滅菌對(duì)于產(chǎn)品的穩(wěn)定性沒有影響。

?1.4 熱分布和熱穿透試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析處理

?在物理確認(rèn)試驗(yàn)中，應(yīng)確認(rèn)關(guān)鍵和重要的操作參數(shù)并有相應(yīng)的文件和記錄。需要關(guān)注的主要參數(shù)可能包括：

?-保溫階段每個(gè)探頭所測(cè)得溫度的變化范圍

?-保溫階段不同探頭之間測(cè)得的溫度差值

?-保溫階段探頭測(cè)得的溫度與設(shè)定溫度之間的差值

?-升溫階段探頭測(cè)得達(dá)到設(shè)定溫度的最短及最長(zhǎng)時(shí)間

?-F0的下限及上限

?-滅菌結(jié)束時(shí)的zui低F0值

?-保溫階段的zui低和zui高壓力

?-飽和蒸汽溫度和壓力之間的關(guān)系

?-保溫階段腔室的zui低和zui高溫度

?-熱穿透溫度探頭之間的zui大溫差或F0的變化范圍

?-最長(zhǎng)平衡時(shí)間

?-最少正常運(yùn)行的探頭數(shù)

?以上參數(shù)的合格標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)結(jié)合滅菌條件、滅菌設(shè)備的特點(diǎn)以及產(chǎn)品的實(shí)際情況制定。通常情況下，熱分布試驗(yàn)的保溫時(shí)間內(nèi)溫度波動(dòng)應(yīng)在±1.0℃之內(nèi)。升、降溫過程的溫度波動(dòng)可通過總體F0值來反映，如果溫度或F0值差別過大，提示滅菌器的性能不符合要求、裝載方式選擇不當(dāng)?shù)龋枰獙ふ以虿⑦M(jìn)行改進(jìn)，重新進(jìn)行驗(yàn)證。另外對(duì)于熱敏感的藥物，還應(yīng)該控制滅菌器的升溫和降溫時(shí)間，以保證輸入的熱能控制在合理的范圍內(nèi)，不會(huì)對(duì)產(chǎn)品的熱穩(wěn)定性造成影響。

?2.生物學(xué)確認(rèn)

?濕熱滅菌工藝的微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)是指將一定量已知D值（微生物耐熱參數(shù)）的耐熱芽孢（生物指示劑）在設(shè)定的濕熱滅菌條件下進(jìn)行滅菌，以驗(yàn)證設(shè)定的滅菌工藝是否確實(shí)能使產(chǎn)品達(dá)到預(yù)定的無(wú)菌保證水平。生物指示劑被殺滅的程度，是評(píng)價(jià)一個(gè)滅菌程序有效性的直觀指標(biāo)。

?2.1生物指示劑選用的一般原則

?一般情況下，生物指示劑選擇的原則性要求是：芽孢穩(wěn)定、非致病菌、易于培養(yǎng)、有效期長(zhǎng)、保存及使用方便、安全性好。針對(duì)具體的滅菌工藝和具體的產(chǎn)品，還應(yīng)注意所用的生物指示劑的耐熱性應(yīng)強(qiáng)于待滅菌產(chǎn)品中的污染菌。

?濕熱滅菌工藝常用的生物指示劑有以下幾種，嗜熱脂肪芽孢桿菌，生孢梭菌、枯草芽孢桿菌等。對(duì)于采用過度殺滅法的滅菌程序，生物指示劑系統(tǒng)主要是嗜熱脂肪芽孢桿菌的孢子，或其他D值大于1的芽孢。殘存概率法由于其熱輸入量比較低，因此在驗(yàn)證中使用的生物指示劑的耐熱性可以小于嗜熱脂肪芽孢桿菌。

?2.2生物指示劑的使用和放置

?實(shí)際驗(yàn)證過程中可以將生物指示劑接種在待滅菌產(chǎn)品中或直接采用市售的生物指示劑成品，殘存概率法推薦采用直接接種法。由于生物指示劑在不同介質(zhì)或環(huán)境中的耐熱性會(huì)有所不同，當(dāng)采用將生物指示劑接種到待滅菌產(chǎn)品的方法時(shí)，首先應(yīng)考慮產(chǎn)品對(duì)生物指示劑耐熱性的影響。所以對(duì)于具體的品種而言，如果需要將生物指示劑接種至產(chǎn)品之中，應(yīng)測(cè)定生物指示劑在該產(chǎn)品中的耐熱性，即D值。如果生物指示劑與產(chǎn)品不相容，可以用與產(chǎn)品相似的溶液來代替產(chǎn)品。采用市售的生物指示劑時(shí)，如生產(chǎn)企業(yè)不經(jīng)測(cè)試直接使用，應(yīng)能提供相應(yīng)證據(jù)，如供應(yīng)商相應(yīng)的質(zhì)量體系認(rèn)證資質(zhì)、供應(yīng)商質(zhì)量體系的審計(jì)報(bào)告、相應(yīng)批次產(chǎn)品的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和報(bào)告等，證明生物指示劑的可靠性，以確認(rèn)測(cè)試中使用的生物指示劑的D值是準(zhǔn)確的。

?生物指示劑的接種量需要根據(jù)生物指示劑在待滅菌樣品中的耐熱性和滅菌工藝條件來確定，應(yīng)符合挑戰(zhàn)性試驗(yàn)的要求。生物指示劑的接種量可以采用陰性分?jǐn)?shù)法或者殘存曲線法計(jì)算，可以根據(jù)實(shí)際情況（如污染菌的耐熱性，擬用的生物指示劑的D值等）選擇合適的計(jì)算方法。

?裝有生物指示劑的容器應(yīng)緊鄰于裝有測(cè)溫探頭的容器，直接接種供試品宜放置在熱穿透試驗(yàn)產(chǎn)品的緊鄰位置，在滅菌設(shè)備的冷點(diǎn)處必需放置生物指示劑。滅菌器的其他部位應(yīng)裝載產(chǎn)品或者類似物，以盡可能的模仿實(shí)際生產(chǎn)時(shí)的狀況。

?2.3滅菌

?生物指示劑的驗(yàn)證應(yīng)該按照產(chǎn)品設(shè)定的滅菌工藝進(jìn)行滅菌。每個(gè)產(chǎn)品的每個(gè)規(guī)格的每一滅菌程序，至少需要連續(xù)進(jìn)行三次生物指示劑挑戰(zhàn)試驗(yàn)。

?2.4檢查和培養(yǎng)

?可以根據(jù)生物指示劑的生長(zhǎng)特性以及驗(yàn)證時(shí)的接種方式，采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行檢查和培養(yǎng)。完成滅菌后，盡快將挑戰(zhàn)指示劑放入培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意不同的生物指示劑所需要的培養(yǎng)條件也各不相同，應(yīng)根據(jù)所用生物指示劑的特性和供應(yīng)商的說明書來確定培養(yǎng)條件，同時(shí)應(yīng)放置陽(yáng)性對(duì)照樣品。

?2.5試驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)

?根據(jù)生物指示劑的D值和接種量計(jì)算產(chǎn)品在滅菌過程中實(shí)際達(dá)到的SAL值。如果各次驗(yàn)證的結(jié)果不一致，需要分析原因，采取相應(yīng)的改進(jìn)措施后重新進(jìn)行驗(yàn)證工作。

?3.基于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的驗(yàn)證方案設(shè)計(jì)

?濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，如存在不同滅菌器（一般指相同工作和設(shè)計(jì)原理的滅菌器）、處方組成、容器規(guī)格、裝量、裝載方式等情況。在不犧牲無(wú)菌保證水平的前提下，為減少驗(yàn)證試驗(yàn)數(shù)量，降低驗(yàn)證成本，可綜合各方面因素考慮，在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，通過充分的合理性論證，選用具有代表性的滅菌器、待滅菌產(chǎn)品和裝載方式等進(jìn)行滅菌工藝驗(yàn)證，可不必對(duì)所有情況進(jìn)行驗(yàn)證。

?三、注射劑無(wú)菌生產(chǎn)工藝

?注射劑應(yīng)shou選終端滅菌工藝。如經(jīng)充分的研究（包括處方工藝研究、質(zhì)量控制研究等）證實(shí)產(chǎn)品無(wú)法耐受終端滅菌工藝，則可考慮能否通過除菌過濾工藝進(jìn)行過濾除菌，如果可以，可采用包含除菌過濾的無(wú)菌工藝；如果不可以，則可考慮采用無(wú)菌分裝的全無(wú)菌工藝。

（一）無(wú)菌生產(chǎn)工藝的研究

?1.除菌過濾工藝的研究

?除菌過濾是指采用物理截留的方法去除液體中的微生物，以達(dá)到無(wú)菌藥品相關(guān)質(zhì)量要求的過程。采用除菌過濾工藝時(shí)，工藝研究和生產(chǎn)過程控制的重點(diǎn)是影響無(wú)菌保證水平的工藝步驟和工藝參數(shù)，主要包括物料（如原料藥、輔料、內(nèi)包裝材料等）的質(zhì)量控制、除菌過濾系統(tǒng)的設(shè)計(jì)及選擇、除菌過濾工藝參數(shù)的研究、除菌過濾生產(chǎn)過程的控制等。

?通常，除菌級(jí)過濾器指在工藝條件下每平方厘米有效過濾面積可以截留≥107CFU（colony forming unit，集落/菌落形成單位）的缺陷短波單胞菌（Brevundimonas diminuta，曾用名：缺陷假單胞菌）的過濾器。除菌過濾工藝通常選用0.22μm（更小孔徑或相同過濾效力）的除菌級(jí)過濾器。

?應(yīng)盡可能采取措施降低除菌過濾的風(fēng)險(xiǎn)，例如：①宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器，最終的除菌過濾濾器應(yīng)當(dāng)盡可能接近灌裝點(diǎn)；②由于微生物通過除菌過濾器的概率隨著待過濾藥液中微生物數(shù)量的增加而增加，最終除菌過濾前，待過濾藥液的微生物負(fù)荷一般小于等于10cfu/100ml；③應(yīng)通過研究確定藥液配制后至過濾前的存放時(shí)間、藥液過濾操作的時(shí)間、過濾后至灌裝前放置的時(shí)間等工藝時(shí)限。

?除菌過濾器的過濾效能是評(píng)價(jià)除菌過濾工藝的重要參數(shù)，需要進(jìn)行相應(yīng)的研究和驗(yàn)證。通常，影響除菌過濾器的除菌過濾效能的因素包括：①藥液的性質(zhì)，如藥液的粘度、表面張力、pH值、滲透壓等；②過濾步驟的工藝參數(shù)，如過濾的壓力、流速、時(shí)間、溫度等；③除菌過濾器與所過濾的藥液的相互作用，如除菌過濾器與藥液的相容性；④除菌過濾器的過濾總量和使用周期等。除菌過濾器的過濾效能可因產(chǎn)品和操作條件不同而不同，濾器的選擇及工藝參數(shù)的研究應(yīng)考慮上述因素。

?2.無(wú)菌分裝工藝的研究

?無(wú)菌分裝工藝是指滅菌/除菌工藝處理后的原料藥或者原料藥和輔料，用無(wú)菌操作的方法分裝到滅菌后的容器中再進(jìn)行密封的生產(chǎn)工藝。無(wú)菌分裝工藝的工藝研究和生產(chǎn)過程控制的重點(diǎn)同樣是影響無(wú)菌保證水平的工藝步驟，主要包括物料（原料藥、輔料、內(nèi)包裝材料等）的質(zhì)量控制、物料暴露于環(huán)境中可能再污染的操作步驟等。

?關(guān)于物料的質(zhì)量控制，采用無(wú)菌分裝工藝的制劑所涉及的所有物料，都必須采用適當(dāng)?shù)臏缇?除菌工藝處理后方可使用。各物料的滅菌/除菌工藝，都應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證、進(jìn)行監(jiān)測(cè)，并受到良好的控制。同時(shí)需要對(duì)各物料的無(wú)菌性、細(xì)菌內(nèi)毒素水平等進(jìn)行嚴(yán)格控制，通過研究確定相應(yīng)的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。

?原料藥或者原料藥和輔料的分裝步驟是影響產(chǎn)品質(zhì)量和無(wú)菌保證水平的關(guān)鍵生產(chǎn)步驟，應(yīng)結(jié)合生產(chǎn)設(shè)備和產(chǎn)品特點(diǎn)進(jìn)行工藝參數(shù)（如分裝速度和分裝時(shí)間等）的研究，并確定相應(yīng)的工藝控制標(biāo)準(zhǔn)。

?（二）無(wú)菌生產(chǎn)工藝的驗(yàn)證

?無(wú)菌生產(chǎn)工藝驗(yàn)證主要包括除菌過濾工藝驗(yàn)證及無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)。采用除菌過濾工藝的產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行除菌過濾工藝驗(yàn)證及無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)，采用無(wú)菌分裝工藝的產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)。

?1.除菌過濾工藝驗(yàn)證

?除菌過濾工藝驗(yàn)證一般包括細(xì)菌截留試驗(yàn)、化學(xué)兼容性試驗(yàn)、可提取物或浸出物試驗(yàn)、安全性評(píng)估和吸附評(píng)估等內(nèi)容。應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品特點(diǎn)及實(shí)際過濾工藝中的最差條件，對(duì)相關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)進(jìn)行合理設(shè)計(jì)，具體驗(yàn)證操作（如細(xì)菌截留試驗(yàn)中挑戰(zhàn)用微生物的選擇、濾膜的要求，可提取物和浸出試驗(yàn)中的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、提取方式、檢測(cè)方法及安全性評(píng)估，化學(xué)兼容性試驗(yàn)中應(yīng)重點(diǎn)考察的指標(biāo)，吸附試驗(yàn)的試驗(yàn)條件等）可參照《除菌過濾技術(shù)及應(yīng)用指南》及《化學(xué)藥品注射劑生產(chǎn)所用的塑料組件系統(tǒng)相容性研究技術(shù)指南》相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行。其中，結(jié)合產(chǎn)品特點(diǎn)，還應(yīng)關(guān)注的內(nèi)容如下：

?1.1 細(xì)菌截留試驗(yàn)中挑戰(zhàn)溶液的選擇

?藥品和/或工藝條件本身可能會(huì)影響挑戰(zhàn)微生物的存活力，因此在進(jìn)行細(xì)菌截留試驗(yàn)之前，需要確認(rèn)挑戰(zhàn)微生物于工藝條件下在藥品中的存活情況（生存性實(shí)驗(yàn)/活度實(shí)驗(yàn)），以確定合理的細(xì)菌挑戰(zhàn)方法。對(duì)于非殺菌性/非抑菌性的藥液，直接在藥液中接種測(cè)試微生物是測(cè)試除菌級(jí)過濾器細(xì)菌截留能力的shou選方法；對(duì)于抑菌的/殺菌的藥液，可采用修改工藝（如調(diào)整溫度）、修改測(cè)試液配方（調(diào)整pH值、去除殺菌成分或使用產(chǎn)品的替代溶液）等方法對(duì)過濾器進(jìn)行預(yù)處理后再進(jìn)行細(xì)菌挑戰(zhàn)試驗(yàn)。如果使用替代溶液進(jìn)行試驗(yàn)，需要提供合理的數(shù)據(jù)和解釋。對(duì)于同一族產(chǎn)品，即具有相同組分而不同濃度的產(chǎn)品，可以用挑戰(zhàn)極限濃度的方法進(jìn)行驗(yàn)證，替代性地接受中間的濃度。

?1.2 細(xì)菌截留試驗(yàn)條件的合理性

?過濾溫度、過濾時(shí)間、過濾批量和壓差或流速等會(huì)影響細(xì)菌截留試驗(yàn)的結(jié)果。建議對(duì)實(shí)際生產(chǎn)的過濾工藝進(jìn)行一次徹底評(píng)估，包括溶劑性質(zhì)（例如水性的、酸、堿、有機(jī)的）、過濾時(shí)間、工藝壓差、工藝流速、工藝溫度、過濾批量和過濾器設(shè)計(jì)規(guī)范，以便合理設(shè)計(jì)微生物截留試驗(yàn)條件。如果細(xì)菌截留驗(yàn)證研究中，在過濾器的下游檢測(cè)到測(cè)試用微生物，則應(yīng)進(jìn)行調(diào)查。如果調(diào)查確認(rèn)測(cè)試用微生物能穿透完整性檢測(cè)達(dá)標(biāo)的過濾器，那么就應(yīng)重新考慮此種過濾器在這些工作條件下的適用性。

?1.3 關(guān)于除菌過濾系統(tǒng)的完整性測(cè)試

?完整性測(cè)試貫穿于細(xì)菌截留試驗(yàn)以及化學(xué)兼容性試驗(yàn)，除此之外，在藥品連續(xù)三批生產(chǎn)工藝驗(yàn)證及常規(guī)生產(chǎn)過程中也涉及完整性測(cè)試。應(yīng)明確過濾器使用后完整性測(cè)試的潤(rùn)濕介質(zhì)（包括水、乙醇等標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)或藥液），如果采用的潤(rùn)濕介質(zhì)為藥液，則應(yīng)進(jìn)行產(chǎn)品相關(guān)完整性標(biāo)準(zhǔn)的驗(yàn)證以支持該標(biāo)準(zhǔn)的確定。對(duì)于冗余過濾，使用后應(yīng)先對(duì)主過濾器進(jìn)行完整性測(cè)試，如果主過濾器完整性測(cè)試通過，則冗余過濾器不需要進(jìn)行完整性測(cè)試；如果主過濾器完整性測(cè)試失敗，則需要對(duì)冗余過濾器進(jìn)行完整性測(cè)試。對(duì)于經(jīng)過驗(yàn)證需要一系列（兩個(gè)或以上）的除菌級(jí)過濾器的除菌單元，在使用后必須全部通過完整性測(cè)試。

?1.4 關(guān)于濾器重復(fù)使用時(shí)的驗(yàn)證考慮

?過濾器的重復(fù)使用對(duì)于制藥過程來說通常是不被推薦的，如在實(shí)際工作中存在重復(fù)使用的情況，應(yīng)進(jìn)行充分的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，包括細(xì)菌的穿透、過濾器完整性缺陷、可提取物的增加、清洗方法對(duì)產(chǎn)品內(nèi)各組分清洗的適用性、產(chǎn)品存在的殘留（或組分經(jīng)滅菌后的衍生物）對(duì)下一批次產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)的影響、過濾器過早堵塞、過濾器組件老化引起的性能改變等，并提供充分的驗(yàn)證和數(shù)據(jù)支持。

?1.5 關(guān)于采用減菌過濾工藝時(shí)應(yīng)進(jìn)行的驗(yàn)證

?減菌過濾通常設(shè)計(jì)在終端滅菌工藝生產(chǎn)的無(wú)菌制劑的灌裝前端，或非最終滅菌工藝生產(chǎn)的無(wú)菌制劑的除菌過濾工序前端。通常采用0.45μm或0.22μm（及以下）孔徑的過濾器。針對(duì)減菌過濾應(yīng)進(jìn)行的驗(yàn)證包括化學(xué)兼容性、可提取物/浸出物及吸附試驗(yàn)等。

?2.無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)

?無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)是指采用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基或其他介質(zhì)，模擬制劑生產(chǎn)中無(wú)菌操作的全過程，評(píng)價(jià)該工藝無(wú)菌保障水平的一系列活動(dòng)。應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品特點(diǎn)及實(shí)際工藝中的最差條件，對(duì)相關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)進(jìn)行合理設(shè)計(jì)，具體驗(yàn)證操作，包括模擬介質(zhì)的選擇與評(píng)價(jià)（培養(yǎng)基、其他介質(zhì)）、灌裝數(shù)量及容器的裝量、最差條件的選擇、培養(yǎng)方式、結(jié)果評(píng)價(jià)等，可參照《無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)指南（無(wú)菌制劑）》相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行。同時(shí)，應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容：

?2.1 最差條件及干預(yù)操作的代表性

?應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品實(shí)際生產(chǎn)工藝，評(píng)估模擬試驗(yàn)設(shè)計(jì)的最差條件及干預(yù)操作是否能夠涵蓋實(shí)際生產(chǎn)過程中可能產(chǎn)生的情況。

?最差條件并不是指人為創(chuàng)造的超出允許范圍的生產(chǎn)狀況和環(huán)境。為了確認(rèn)無(wú)菌工藝風(fēng)險(xiǎn)控制的有效性，應(yīng)通過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估并結(jié)合無(wú)菌生產(chǎn)工藝、設(shè)備裝備水平、人員數(shù)量和干預(yù)等因素來設(shè)計(jì)模擬試驗(yàn)最差條件。包括但不限于以下方面：1）人員：應(yīng)充分考慮人員及其活動(dòng)對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)工藝帶來的風(fēng)險(xiǎn)。如模擬生產(chǎn)過程的最多人數(shù)，當(dāng)操作人員數(shù)量減少可能導(dǎo)致其他方面污染風(fēng)險(xiǎn)增加時(shí)，則此類條件也視為最差條件之一。參與人員應(yīng)包括日常參與到無(wú)菌生產(chǎn)的全部人員，如生產(chǎn)操作、取樣、環(huán)境監(jiān)測(cè)和設(shè)備設(shè)施維護(hù)人員，同時(shí)應(yīng)考慮以上人員交叉作業(yè)、班次輪換、更衣、夜班疲勞狀態(tài)等因素。2）時(shí)限：在條件允許的情況下，適當(dāng)考慮模擬實(shí)際生產(chǎn)操作過程中房間、設(shè)備、物料消毒或滅菌后放置的最長(zhǎng)時(shí)間及最長(zhǎng)的工藝保留時(shí)限等，如設(shè)備設(shè)施、分裝容器、無(wú)菌器具滅菌后最長(zhǎng)的放置時(shí)間等。3）灌裝速度/分裝速度：模擬試驗(yàn)應(yīng)涵蓋產(chǎn)品實(shí)際灌裝速度范圍，基于無(wú)菌風(fēng)險(xiǎn)的角度分析評(píng)價(jià)灌裝速度對(duì)工藝過程及其他方面的影響程度。例如采用最慢的灌裝速度、zui大的容器用以模擬最長(zhǎng)暴露時(shí)間；或采用最快的灌裝速度、最小的容器時(shí)，用以模擬zui大操作強(qiáng)度/難度。4）環(huán)境：無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)期間環(huán)境的消毒處理應(yīng)依據(jù)正常生產(chǎn)期間的消毒方法進(jìn)行，避免過度消毒及消毒劑的過度使用。

?干預(yù)是指由操作人員按照相關(guān)規(guī)定參與無(wú)菌工藝生產(chǎn)的所有操作活動(dòng)。干預(yù)可分為固有干預(yù)和糾正性干預(yù)。固有干預(yù)是指常規(guī)和有計(jì)劃的無(wú)菌操作，如裝載膠塞、環(huán)境監(jiān)控、設(shè)備安裝等；糾正性干預(yù)是指對(duì)無(wú)菌生產(chǎn)過程的糾正或調(diào)整，如生產(chǎn)過程中更換部件、設(shè)備故障排除等。

?2.2 不同形式注射劑無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)

?2.2.1 注射液

?注射液通常采用培養(yǎng)基溶液進(jìn)行常規(guī)的無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)。

?2.2.2 注射用凍干粉末

?注射用凍干粉末的無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)還包括凍干過程的進(jìn)箱、凍干、出箱操作（冷凍可能會(huì)抑制微生物生長(zhǎng)，通常不模擬冷凍過程），通常情況下可采用縮短維持時(shí)間模式，即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞后將容器轉(zhuǎn)移至凍干機(jī)內(nèi)部分抽真空，維持時(shí)間短于實(shí)際凍干周期，然后箱體破空（可依據(jù)產(chǎn)品特性設(shè)計(jì)破空次數(shù)）后進(jìn)行壓塞。

?2.2.3 注射用無(wú)菌粉末

?注射用無(wú)菌粉末其分裝所用的生產(chǎn)線與常規(guī)液體灌裝線不同，進(jìn)行無(wú)菌工藝模擬試驗(yàn)時(shí)需要將培養(yǎng)基及模擬介質(zhì)均灌裝入容器中，模擬方法通常包括：使用無(wú)菌粉末分裝設(shè)備將液體培養(yǎng)基和模擬介質(zhì)進(jìn)行一步灌裝；加裝特殊設(shè)備灌裝液體培養(yǎng)基；先在線灌裝無(wú)菌液體培養(yǎng)基到容器中，然后再在生產(chǎn)線上進(jìn)行無(wú)菌粉末的分裝模擬；先在生產(chǎn)線上進(jìn)行無(wú)菌粉末的分裝，然后再灌裝無(wú)菌液體培養(yǎng)基到容器中；或其他方式。應(yīng)根據(jù)具體情況設(shè)計(jì)培養(yǎng)基灌裝工藝，并充分說明設(shè)計(jì)的合理性。

?四、附件（內(nèi)容略）

?五、參考文獻(xiàn)（內(nèi)容略）